Atelier Génotypage

Atelier Génotypage

Atelier reproduction et génotypage souris

                     

Responsables/contacts : Jean-Christophe Helbling : jean-christophe.helbling@inrae.fr et Céline Ducroix-Crépy : celine.ducrox-crepy@inrae.fr

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Objectif:

Reproduction des lignées du laboratoire Nutrineuro et sélection par génotypage

Techniques utilisées

Extraction rapide de l’ADN d’un échantillon de queue de souris (5mm), PCR simplex et multiplex, électrophorèse sur gel d’agarose

Enzyme de polymérisation « Hot Start Taq Pol » produite et purifiée par notre équipe New !!!

•11 PCR différentes permettant de discriminer 10 lignées et sexage pré-naissance

-k.o. Cbg                       -Cx3CR1-CRE-ER

-CamKCre                     -CB1

-CMVCre                       -D2-Cre

-NestinEGFP

-Fat

-GFAP-Cre-ERT2

-Cx3CR1-GFP

-SRY-MYO (sexage)

Organisation des lignées avec l’utilisation du logiciel PHARE

Matériel: Thermocycler Applied Biosystems, Imager Gel Doc. U-Genius Syngene New !!!

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Quelques chiffres en 2013

3600 souris, 5000 PCR, 0.70 euros la PCR pour le laboratoire

A venir

Discrimination automatique des génotypes obtenus sur gel avec le Logiciel GeneTools, Syngene

Contact

jean-christophe.helbling@inra.fr

tel:33+557579524

Date de modification : 14 août 2023 | Date de création : 26 mars 2014 | Rédaction : CS